乳及乳制品中三聚氰胺检测液相色谱仪

三聚氰胺（Melamine）是一种重要的三嗪类含氮杂环有机化工原料，主要用于三聚氰胺-甲醛树脂，广泛用于木材加工、塑料、涂料、造纸、纺织、制革等行业，为白色晶体。三聚氰胺不是食品添加剂,为何会出现在乳及乳制品中呢? 食品工业中常常需要测定食品的蛋白质含量,由于蛋白质有一百多万个品种,直接测量蛋白质技术上比较复杂,所以国际组织公职分析化学家协会( Association of Official AnalyticalChemist s , 简称AOAC) 制定了用凯氏定氮法的方法测定氮原子的含量,间接推算食品中蛋白质含量的方法,各种食品有不同的换算系数,其中乳制品的换算系数为6. 38 。**各国都遵照执行该方法标准,我国也引用该方法标准作为**标准。由于三聚氰胺含氮量( 66 %) 与蛋白质平均含氮量( 约16 %) 相比含有更高比例的氮原子,所以被一些造假者利用,添加在食品中以造成食品蛋白质含量较高的假象,从而造成诸如2007 年美国宠物食品污染事件和2008 年中国毒奶粉事件等严重的食物**事故，其进入体内后似乎不能被代谢,而是从尿液中原样排出,但是由于各人体质不同,有人会在身体内产生与氰脲酸结合的晶体状聚合物,而引起肾结石、膀胱结石等病症。三鹿奶粉事件引发了对三聚氰胺检测的广泛关注，**质量监督检验检疫总局和**标准化管理委员会相继发布了《原料乳及乳制品中三聚氰胺检测方法》（GB/T22388-2008）和《原料乳中三聚氰胺快速检测-液相色谱法》（GB/T22400-2008）**标准。同时**质检总局正式公布《企业婴幼儿配方乳粉许可条件审查细则（2010版）》和《企业乳制品许可条件审查细则（2010版）》，要求目前所有已获乳制品及婴幼儿配方乳粉许可的企业，在2010年底前须重新申请许可，许可机关要重新进行审查。2011年3月1日起，未重新获得许可的，停止乳制品及婴幼儿配方乳粉。与原有细则相比，新细则的产品检验项目有所增加，尤其是婴幼儿配方乳粉共有60余项企业自检项目。两项新细则都特别要求，企业要保证对购入的生乳和原料乳粉批批进行检验。

一、仪器概述 
1、乳及乳制品中三聚氰胺检测液相色谱仪LC-3000A整套系统由P3000二元高压泵、UV3000检测器、进样阀、溶剂托盘、色谱柱、工作软件等组成；安装、调试及使用都非常简单。  
2、P3000高压输液泵是以CPLD技术为核心，由单片机控制的高精密输液泵系统。全数字频率发生系统，先进的马达驱动系统友好的人机显示界面使操作很方便，先进的泵头及单项阀设计思路，融汇了当今**上***的经验，使该系统在各种条件下都能保证输液的精度及重复性。  
3、UV3000是一种分光检测器，可以匹配任何输液泵，适用于化学分析、农药、制药、化工等领域有着广泛的应用。采用了全数字、高集成化设计理念，大大降低仪器的噪声；基于数字信号传输和处理，该检测器的信号可直接输入到计算机的串行口进行采集，完全甩掉了传统仪器**使用的数据采集卡！  
二、主要特点 
1、P3000系列高压分析/半制备泵  
输液方式 双柱塞往复泵，双柱塞吸液。  
显示 320X240点阵大屏幕液晶显示，蓝色背光  
系统保护 慢速启动，停止，**/*小压力可调，自动存储  
系统连接 1/8"管路连接  
控制 独立模式 通过前面板的按键设定所有工作参数。工作于高  
压梯度模式时，其中一台泵为主泵，控制其它相同型号的高  
压输液泵，并可通过屏幕上的梯度曲线对所实现的梯度模式  
进行验证。  
串口模式 通过RS232口，对高压输液泵进行控制  
电源 220V±10％，50Hz，400W  
2、UV3000UV/VIS检测器  
控制 独立模式 通过前面板按键  
串口模式 通过RS232口软件控制  
显示 320X240大屏幕液晶显示，可调蓝色背光  
电源功率 220V±10%，50Hz，60W  
外形尺寸及重量398X149X267mm（深X高X宽），14kg 

三、仪器配置

1. 方法原理
 采用HPLC法测定三聚氰胺，成本低，不需要衍生，简便易行。采用外标法进行定量分析。
 本方案采用鲁创有效液相色谱仪LC-3000二元高压梯度，按照**标准GB/T 22388-2008对牛奶中三聚氰胺进行检测。该方法稳定可靠，检测范围广泛。

2. 仪器和试剂
 鲁创液相色谱仪LC-3000二元高压梯度系统：输液泵，配梯度单元和在线脱气装置；LC-3000紫外检测器；手动进样器7725i，色谱工作站N2000P,离心机1台（转头6*50ml）；固相萃取小柱和萃取装置；氮吹仪；
 三聚氰胺对照品购自sigma公司，样品液态奶购买于超市，实验中用到的其他试剂如三氯乙酸、氢氧化钠、柠檬酸和辛烷磺酸钠均为分析级。

3. 色谱条件
 色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm （也可选用C8柱）
 缓冲液：10mM柠檬酸, 10mM辛烷磺酸钠
 流动相：缓冲溶液:乙腈=90：10
 进样量：20uL
 流  速：1.0mL/min
 柱  温：40度

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