
液相色谱仪分析技术以灵敏、准确、简便、快速分析的优点,在食品、水质、医药、生物、环保等领域已拥有广泛应用。因为传统的化学分析法操作不便,误差大,液相色谱仪分析法在生物制药、生命科学等方面有着广泛的发展前景。
一、 HPLC是目前生物样品药物分析中应用广泛、发展迅速的一种分析方法由于生物样品组分复杂,特别是含大量蛋白质等大分子杂质,易引起柱头堵塞而升高柱压;另外试样中药物浓度较低,需进一步富集才能检出,以使药物净化、富集,需要对试样进行适当的前处理。
1)通常的方法是进行液萃取,但这种方法特点,如存在诸如易产生乳化、杂质较多、回收率低、需要的样品量大等等。
2)固相萃取是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理,使液体样品通过一吸附剂,保留其中某一组分,再选用适当溶剂冲去杂质,然后用少量溶剂迅速洗脱,从而达到分离、净化与浓缩的目的作为从生物样品中提取净化微量药物或其代谢产物的新方法,己被广泛地用于生物样品的检测中,其中尤以与技术结合用于生物样品的分析引人注目。
二、氨基酸分析主要是制成荧光衍生物或酰氯的衍生物,然后测定其序列。可用有效液相色谱的柱后衍生物法测定其序列。用四烷基氯化胺肽形成离子对或有效凝胶色谱测定蛋白质,其分离效果也很好。且液相色谱仪速度快、操作简便。 随着科学进步发展,其应用领域将进一步扩展。
三、细胞核中甙及核甙酸:分析甙及核甙酸可用不同的检测器或酶转移检测器或利用酶反应进行定性测定。C18柱用含磷酸的缓冲水溶液的梯度淋洗法能拥有满意的结果。
四、核酸的分析研究:核算主要是分离核酸中RNA、DNA及碎片。现在使用硅烷化的硅藻土或长碳链季胺盐涂渍,在上面制成系列填充柱。分离出t-RNA,r-RNA及DNA碎片效果很好。有没用缓冲液淋洗,可利用此技术做RNA碎片的序列分离制备工具,对生物研究起到了至关重要的作用。
五、酶的液相色谱分析:酶是在血清及其他生理样品中常有的反应产物,测定碱性或酸性磷酸酶的含量,测定反应产物中腺甙脱 胺酶的含量等。
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